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【求助】请教一个关于胶体金释放的问题
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这个帖子发布于10年零94天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
近日,在做胶体金实验,遇到一个T线显带较慢的问题,本人疑为金子释放速度过慢,想问一下各位高手,有什么物质能提高金子释放速度???
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胶体金复合物的结合垫,预先处理,一般用含蔗糖,吐温等的缓冲液,浸泡后晾干~我实验时用的是5%蔗糖,0.05%吐温20的PBS,具体依你的实验需要
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蔗糖主要是发挥保护蛋白活性的作用。如果只是考虑释放的问题应该从水溶性入手,根据不同的抗原抗体和膜基质筛选不同的表面活性剂(如TWEEN)在不同浓度梯度下的效果优化,应该可以解决问题。
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可以做一个简单的梯度滴加实验,用TWEEN。
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关于丁香园→ 专家你们好!想请教个问题;我孩子手上皮肤
专家你们好!想请教个问题;我孩子手上皮肤
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健康咨询描述:
专家你们好!想请教个问题;我孩子手上皮肤开始一块块的变白。想得到您的指点和治疗。我儿子的手,一块块的变白,近期发展很快,很苦恼。去医院就诊,医生说是白癜风。
曾经的治疗情况和效果:
没有遗传史。
想得到怎样的帮助:请问专家;应该怎样的治疗。用什么药可以治愈?万分的感谢!渴望能得到您的帮助。
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擅长: 皮肤病、白癜风
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&&&&&&建议可以通过“M-D多维白癜风康复体系”进行治疗,此疗法综合分子基因学、细胞病理学、分子免疫学等多种学科,从科学全面检查入手,主诊专家根据患者病情,检测黑色素缺失诱因后,进行分类、分型、分期、分性后,制定合适的诊疗方案,最终使白斑局部以及全身有害的因素下调,恢复正常皮肤颜色,病情得到长期缓解。您也可以提供一下详细病情,以便我们针对性指导。白癜风最大的特点就是扩散,此病属于难治性疾病,其发病诱因有几十种,如精神因素、自身免疫、黑色素自毁等,盲目治疗,会引起白斑的扩散病情加重的情况,建议您及时到白癜风专科医院检测出黑色素缺失诱因,从根源入手针对性治疗,目前临床疗法很多,如药物、光疗、植皮等见效最快的的是M-D多维白癜风康复体系,配合医生治疗相信很快可以取得明显效果。另外要加强日常防护是很重要,少吃含维生素C类的食物,橘子、山楂、猕猴桃、西红柿,辣椒、香菜、韭菜;多吃花生、核桃、黑芝麻、黑豆、瘦肉等,对病情康复有好处,烟酒一定要忌,不要在太阳下暴晒,以免加重病情!
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&&&&&&病情分析:&&&&&&你好,白癜风是临床上常见的后天性色素减退性皮肤病,主要表现为局限性或泛发性色素脱失,皮肤上可出现大小不等的圆形或椭圆形白斑,边界清晰,边缘色素较深。白癜风发病的原因到目前为止还不十分清楚,发病因素是多方面的,与免疫功能失调,遗传因素,精神神经因素,化学因素等有一定关系。它不影响正常生活,不传染。&&&&&&指导意见:&&&&&&建议你带儿子去当地二甲以上正规医院看皮肤科,咨询医师,确诊是否白癜风,如是,用外用中药主要制剂为酊剂、浸剂,亦有散剂、膏剂等缓解,避免紫外线照晒,正常工作,注意休息,多吃新鲜蔬菜水果,少吃油腻辛辣食物,有情况随时就诊。切忌到江湖郎中等乱花钱,反而加重症状。
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&&&&&&在治疗此病上最主要的是,专病专治,针对不同病因,对症治疗,才是治疗白癜风的最好的选择。建议可以通过“GX-B多维白癜风康复体系”进行治疗,此疗法是目前临床上最为先进的治疗方法,它通过9大项目六大检查超百项的检测技术查出发病诱因,针对发病诱因制定个性化的治疗方案,积极配合医生治疗可以取得较好效果,同时加强日常防护,尽快把病治好! &&&&&&以上是对“专家你们好!想请教个问题;我孩子手上皮肤”这个问题的建议,希望对您有帮助,祝您健康!
擅长: 胡海彥主任对各个年龄层、各类型疑难白癜风的诊断与治疗都具有丰...
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&&&&&&建议患者不要盲目用药,治疗白癜风的药物有多种,但都有一定的适应症,不一定都适合每位患者,用药不对症的话,会导致白斑的加重,如果长时间用的话,可能会对肝、肾功能产生一定的损坏,还会加重病情,反而产生了抗药性、耐药性,损坏了白斑区的皮肤结构和血液的微循环结构,致使延误病情,错失最佳的治疗时机。建议患者要及早去专业的白癜风治疗医院进行检查确认一下具体病情后,再进行针对性的治疗。
提供、推荐服务有(就诊服务、义诊服务)
副主任医师
擅长: 擅长白癜风、银屑病等各类皮肤病疑难杂症。
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&&&&&&您好!白癜风的治疗,北京白癜风军颐中医院一向是不赞成对患者一味的盲目开多种药物,长期服用对患者自身是有一定健康危害的。所以对于白癜风的治疗不能靠单一的药物治疗,需采用诺贝尔理论国际前沿技术“黑色素超导激活治疗体系”,可彻底攻克白癜风的久治不愈及愈后易复发。北京白癜风军颐中医院高调宣布:应用国际技术“黑色素超导激活治疗体系”避免的常规治疗的失误和不安全性,更有效避免副作用的发生。只需2-8小时,白斑区黑色素细胞便可成活;一般七天见效,2个月左右就能恢复到正常肤色。如您想了解更多有关白癜风的任何疑问与治疗方法都可点击黄色按扭“点击咨询”,与白癜风专家苏宝利医师,进行一对一沟通。
副主任医师
擅长: 过敏性、免疫性、感染性、损美性皮肤病,银屑病(牛皮
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&&&&&&治疗白癜风的药物有上千种,并不是每一种药物都适合每一位患者的,用药不当或用量不当都是有可能加重病情的。在还没有检查清楚自己患白癜风的真正原因之前,建议您不要盲目的用药。每种药物都有一定的副作用,到时候花钱不说,还会给之后的治疗带来困难。治疗白癜风,首先建议您到专门治疗白癜风的医院采用专门的仪器进行全面的检查,查出发病诱因,黑色素丢失的程度及白斑病灶损害的程度等检查,再对症下药,方可达到治愈的效果。这样才是科学的
擅长: 白癜风
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&&&&&&治疗白癜风,首先建议您到专业治疗白癜风的医院采用专业的仪器进行全面的检查,查出发病诱因,黑色素丢失的程度及白斑病灶损害的程度等检查,再对症下药,方可达到治愈的效果。这样才是科学的。 &&&&&&以上是对“专家你们好!想请教个问题;我孩子手上皮肤”这个问题的建议,希望对您有帮助,祝您健康!
电话:028-
擅长: 局限型、散发型、泛发型、肢端型等各类型白癜风的诊断与治疗。
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&&&&&&如何选择医院和医生是关键,至于选择何种治疗方法和药物还要由专科医生作最后决定,患者千万不可自作主张,以免贻误病情。白癜风是一种顽疾,单靠一种方法很难奏效,目前我们多采用综合治疗的方法。首先应消除各种不良刺激因素,改善精神状态和不良的生活、工作环境,保持良好的心理,增强自身免疫功能,早防、早治,并持之以恒,则疗效较好。治疗时还应区分不同病因,如有微循环障碍,应加强身体锻炼,促进血液循环,并可采用活血化瘀中药治疗。增强免疫功能的药物较多,如斯奇康、多抗甲素、转移因子等,可适当选用。局部应用补骨脂素类药物、糖皮质激素、硫汞白癜风洗剂、氮芥酒精等外涂,也有一定疗效。对于面颈部白癜风,要避免使用增白类化妆品,忌服维生素C类药物。少食用西红柿等。如能早期发现病灶,及早治疗,约经l~3个月左右治疗,一般能恢复正常
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疾病百科| 白癜风(别名:白驳风)
挂号科室:皮肤科
温馨提示:要想彻底治好白癜风,将是一件非常困难的事情,患者应该到正规医院接受正规治疗。
白癜风是一种常见多发的色素性皮肤病。该病以局部或泛发性色素脱失形成白斑为特征,全身各部位可发生,常见于指背、腕、前臂、颜面、颈项及生殖器周围等。女性外阴部亦可发生,青年妇女居多。是一种获得性局限性或泛...
好发人群:所有人群
常见症状:色素脱失、色素性皮疹、色素异常
是否医保:医保疾病
治疗方法:药物治疗
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【请教】关于测OD值时的波长选择问题
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这个帖子发布于12年零131天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请问:用MTT测IL-2活性实验中,测OD值时应选择的波长是多少? 492? 560? 570? 630???用DMSO作细胞裂解剂和用酸化异丙醇作裂解剂时会不会影响波长的选择?测OD值时波长的选择是由什么决定的?
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MTT法是一种快速、简便的颜色反应的测定方法。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂,生成蓝色的formazan结晶。还原生成的formazan结晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸钠(pH 4.7)的MTT溶解液中溶解,利用酶标仪测定光密度OD值,以反映出活细胞数目,当然蓝色的formazan结晶也可以用DMSO来溶解。一般来说波长rank是:490nm~570nm。所以个人认为波长的选择取决于你的酶标仪,我们实验室的酶标仪波长选择范围较窄,所以我一般是选择570nm。
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在含量测定时确定波长时用紫外扫描时出现了三个吸收峰,那就该用哪个波长?
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关于丁香园关注今日:17 | 主题:221797
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请教:鼠源一抗能否用于小鼠
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这个帖子发布于15年零99天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请教各位战友:
若要检测受体小鼠体内的人源细胞,能否用小鼠抗人的一抗,然后二抗是HRP标记的羊抗鼠IgG?
我觉理论上应该不行,因为在小鼠体内的很多细胞表面都有Ig超家族的分子,这样做不是会产生假阳性吗?
可我确实看到有文献确实是这么做的。
我觉得很奇怪。请各位指教。
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你是做western blot用吗?
应该是可以的。经常有人用单抗检测小鼠体内目的蛋白的,甚至有人用来做免疫组化。也没见有人说这样不行的。
你主要是考虑小鼠体内的IgG与抗鼠的二抗发生非特异性反应,是吧?由于不管是做Western还是免疫组化,样品都会用PBS或生理盐水等洗去组织上的血液(免疫组化用的切片制备之前先会通过灌注置换出体内的血液,western样品匀浆之前也会先冲洗干净),所以这种非特异性反应是可以忽略的。
另外,你所说的“细胞表面的Ig超家族的分子”应该是不会与二抗反应的,因为商品化的二抗特异性应该是特异的与IgG反应的。
个人意见,仅供参考。
祝实验顺利!
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丁香园准中级站友
商品化的二抗也是针对IgG的Fc段的抗原表位,细胞表面的Ig超家族的分子没有类似的表位吗?
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shmxia 商品化的二抗也是针对IgG的Fc段的抗原表位,细胞表面的Ig超家族的分子没有类似的表位吗?我觉得应该没有这种交叉反应。否则的话,用抗小鼠IgG做免疫组化或免疫细胞化学实验,岂不是会把每个细胞膜都染出来?
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【求助】请教:免疫组化双标的几个问题??
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这个帖子发布于4年零190天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已关闭悬赏丁当:2
本人最近要做一张片子上染两个蛋白,一个在胞浆,一个在胞核,抗体一个是鼠来源,一个兔来源步骤如下:1.脱腊,脱二甲苯,水化2.修复后封闭内源性过氧化物酶3.同时加两种一抗,4度过夜4.pbs洗后加其中一种二抗,然后加其中一种显色剂,如AEC5. 显色后pbs洗后加另外一种二抗,再加显示剂 , 如 DAB问题如下:1.二抗选用什么?用单独分开的二抗,如驴抗鼠或者马抗兔,还是兔鼠通用的都可以,因为我手头上现在有个兔鼠通用的二抗2. 用什么酶标记的二抗?都可以用HRP标记的还是要分开标记的,如HRP标记的兔抗和碱性磷酸酶标记的鼠抗3. 显示剂的选择,我打算用AEC和DAB,我看了园里的帖子,有人用HRP标记的兔鼠通用的二抗来做,这样显示剂能否区分开??一般都是在加了二抗后加显色剂,比如加了AEC后显示红色,那么对后面的DAB显示会不会有影响?谢谢
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建议用免疫荧光更加好看些。用不同颜色荧光染色来标记二抗,与一抗结合,荧光显微镜下观察,拍照。
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湘雅沂哥 建议用免疫荧光更加好看些。用不同颜色荧光染色来标记二抗,与一抗结合,荧光显微镜下观察,拍照。 我做的是免疫组化,已经做完了,审稿人建议在一张片子上同时做两个指标,免疫荧光比组化更容易做吗?谢谢阿
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在显示荧光图像部分处理起来当然容易多了。前面的步骤不会比免疫组化难,而且基本相同。
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